关于典型蒸汽灭菌器的编程和操作的大多数错误都与蒸汽灭菌的基本原理有关。
- 将阀门关闭的容器，带有拧紧螺旋盖的空玻璃瓶或固定的铝箔放置在灭菌器中。
因此，蒸汽不能直接接触内表面，也不会发生灭菌。这个问题可以通过确保灭菌器中的所有物品都有蒸汽进入和空气排出的方式来解决。如果不确定物品的配置、设置、包装或方向是否允许足够的蒸汽渗透，则可以在物品内部放置热电偶、化学和/或生物指示剂以确定。
- 袋装和/或重包装的物品在腔室中紧密包装。
因此，在预处理阶段之后，空气可能会滞留在物品中并防止灭菌。物品不应过度包装，装载物品之间应保持足够的空间。必须正确设置预处理真空和压力脉冲，以实现从负载中完全排出空气。通常，应将四个（或更多）预处理真空脉冲编程为至少达到 28 英寸（711 毫米）汞柱真空（（1.0 psia 或 6.9 kPa（绝对）），以确保在最坏情况下负载下有足够的空气去除。一些非常密集的负载可能需要在峰值预处理真空下短暂（2 到 5 分钟）保持阶段，以便有时间去除滞留的空气。预处理压力脉冲应编程为 3 至 5 psig（（21 至 34.5 kPa（表压））。为真空前压力脉冲设置的较高压力会导致过热过多，并且在暴露阶段的最初几分钟内难以稳定温度。
- 较重的物品放在顶层架子上。
在灭菌周期完成后，在放置在中下架子上的物品包装纸的外部观察到水滴和/或污渍。由于物品不干燥，因此无法从灭菌器中无菌取出。冷凝是蒸汽与负载较冷表面接触的自然结果。冷凝水将从一个架子掉到另一个架子。负荷项目越密集，产生的冷凝水就越多。因此，将较重的物品放在底部架子上。此外，考虑在装载前在每个消毒器装载车架上放置棉床单或不起毛的毛巾，以吸收冷凝水。这也有助于干燥。当冷凝水吸入床单或无绒毛巾时，冷凝水表面积大大增加，并且在干燥阶段蒸发的速度比液滴或水坑中的相同量的冷凝水快得多。
- 负载太密集或项目在负载中的位置不正确。
因此，在循环结束时观察到潮湿或潮湿的物品。包装好的物品的位置允许冷凝水收集，不会燥。物品的位置应允许冷凝水向动。在循环结束时保持湿润的物品（包装纸、袋子、过滤器或其他多孔生物屏障）在从灭菌器中取出时无法防止负载污染。当负载在灭菌器外冷却时，包装中的水将被吸入包装的物品中。环境中存在的任何污染物都可以与水一起通过无菌屏障吸入。湿负载还有许多其他可能的原因。最常见的是：
虽然没有单一的解决方案可以消除湿负荷，但试验干燥时间、重新定位物品、降低负载密度、修改循环设置和调查蒸汽质量可能会解决问题。
- 干燥真空度或编程时间不足
- 袋装中的橡胶或塑料物品（即橡胶塞、塑料管）可能需要额外的干燥（对于这些物品，建议使用脉冲空气或加热脉冲空气干燥工艺）
- 湿蒸汽
- 袋子平放在灭菌器架子上或堆叠在一起。
因此，袋子内部可能有水滴，无法无菌地从消毒器中取出。典型的原因是，在预处理干燥阶段，蒸汽渗透袋子并接触物品表面时自然产生的冷凝水没有被去除。袋子应适当间隔并放置在将袋子固定在其边缘的架子中（图 7），以防止冷凝水在袋内积聚。袋子不应平放在灭菌器架子上。袋子不应超载。请记住，更多的质量意味着更多的冷凝水。应编程足够的干燥真空度和时间，以允许冷凝水完全蒸发。应纠正湿蒸汽。双袋可能需要额外的预真空脉冲，在最大真空下停留时间和增加干燥时间。切勿组装双袋，以免看到里面的物品。袋盖不应折叠。
- 将通风容器中的液体放入深锅中以捕获沸腾（缓慢排气循环）。
平底锅将容纳水，它将容纳空气。由于空气滞留，蒸汽无法接触锅内的表面，并且不会被消毒。解决方案是消除锅并调整灭菌器缓慢排气速度以防止沸腾。如果无法通过调节缓慢排气速率来消除少量沸腾，则可以使用深度小于 1 英寸（25 毫米）的浅锅。
- “煮过头”的培养基 培养基的过度灭菌会使糖分焦糖化并使培养基
无用。不建议将典型的矫枉过正方法用于培养基灭菌。曝光阶段应编程为达到所需的SAL，而不是不再。建议使用负载探头和 F0 暴露控制装置对大于 100 ml （3.4 oz） 的容器中的培养基进行灭菌。如图8所示，F0是121.1°C（250°F）以外温度下的等效暴露的计算。当液体被加热时，计算出的F0（从负载探头温度开始）被累积，直到达到选定的F0暴露值（分钟），此时循环进入排气/冷却阶段。例如，在图表上，同一生物种群的杀灭率在 118°C （245°F） 下是 121°C （250°F） 时的有效性的一半。因此，在118°C（245°F）下，杀死相同数量的生物体需要两倍的暴露。
- 对过热的真空泵使用冷水。
因此，真空泵可能无法达到 1.0 psia （6.9 kPa）。预真空灭菌器的核心是水环真空泵。水环式真空泵的效率和最大真空能力受到夏季通常遇到的较高水温的不利影响。在运行过程中，泵内的水通过来自灭菌室的机械摩擦和热能加热。如果在预处理或后调节真空峰值期间泵内的水温度达到 39°C （102°F），泵内的水将以 ≤ 1.0 psia （6.9 kPa） 的速度沸腾并引起气蚀。在这种情况下，灭菌室无法达到推荐的 1.0 psia （6.9 kPa） 预处理真空度。这种情况的常见“解决方法”是将预真空脉冲的设定点更改为可以达到的水平。除非增加真空脉冲的数量，否则可能会导致空气去除不足，从而导致循环时间延长和空气去除效果降低。在夏季，如果供应给泵的水没有冷却，通常会观察到泵的内部温度高于 39°C （102°F）。冷冻水是理想的，但通常太昂贵，无法在灭菌器真空泵布置中使用，其中水从真空泵流向排水。推荐的解决方案是真空泵水的再循环/冷却系统，该系统在闭环热交换器中使用冷冻水。这种配置是环保的，因为它节省了大量的水。此外，真空泵的效率不受季节性水温波动的影响。
- 负载探头可用，但未使用。
大多数现代灭菌器包括（可选）RTD负载探头和F0暴露控制，用于液体灭菌，但很多时候不使用探头。如果配备负载探头，则可以通过液体的温度而不是排水管中的温度来控制暴露。如果没有负载探头，液体的温度是未知的，只能估计，导致不充分（非无菌）或过量的F0（煮过头）。负载探头应放置在接近被灭菌最大体积液体体积的水容器中。然后必须在灭菌器控制设置中选择负载探头控制/ F0。
- 压力/真空率控制可用，但不使用。
大多数现代灭菌器包括真空和压力斜坡的（可选）速率控制，但很多时候不使用速率控制。当不施加压力速率控制时，蒸汽将在预处理压力脉冲期间以最大速度进入腔室，这会产生过热问题和前面讨论的EN285合规性问题。减慢压力速率可以让过热在上升过程中消散。当不应用真空速率控制时，腔室将以真空泵的最大速率减压。与此相关的典型问题是爆破袋。减慢真空速率可使袋内压力有时间平衡，并防止在预处理和后处理真空阶段爆裂。
结论
蒸汽灭菌是一个依赖于基本原理的过程，这些原理有时是灭菌器用户未知或忽视的。很大一部分蒸汽灭菌器故障可以通过这些基本原理的逻辑和实际应用来解决。应该注意的是，对灭菌器使用者的适当培训应包括这种教育。正确的包装和装载技术对于安全和成功的灭菌至关重要。与任何关键工艺设备一样，适当的维护和校准至关重要。
